斑馬魚促性腺激素釋放激素基因的克隆與表達

目的 克隆斑馬魚促性腺激素釋放激素(GnRH)基因,構建重組質粒pQE30-GnRH并獲得表達蛋白.方法 從斑馬魚腦組織提取總RNA,應用RT-PCR方法獲得斑馬魚GnRH cDNA.將該cDNA插入質粒pQE30中,并使其在大腸桿菌RB791中表達.經(jīng)IPTG誘導后SDS-PAGE電泳檢測蛋白的表達情況.結果 斑馬魚GnRH cDNA長為207bp,編碼的GnRH前體為69個氨基酸殘基.與鯉魚、鯽魚、擬鯉、黑頭軟口鰷等淡水鯉科魚類的氨基酸序列同源性比較,分別為74.4%,69.8%,73.3% 和 73.3%.電泳結果顯示一新的分子量約為14.4 kDa的特異蛋白帶.結論 本研究所克隆的斑馬魚GnRH基因屬于GnRH-Ⅱ.構建斑馬魚GnRH原核表達質粒不僅獲得大量的GnRH蛋白,還可對該蛋白做進一步分離純化以及生物活性方面的研究.

作 者： 謝保勝 段瑞君 藤原滋樹 Xie Baosheng Duan Rui Jun Shigeki Fujiwara   作者單位： 謝保勝,段瑞君,Xie Baosheng,Duan Rui Jun(青海大學生物科學系)

藤原滋樹,Shigeki Fujiwara(日本高知大學理學部) 

刊 名： 青海醫(yī)學院學報  英文刊名： JOURNAL OF QINGHAI MEDICAL COLLEGE  年，卷(期)： 2009 30(1)  分類號： Q78  關鍵詞： 斑馬魚   促性腺激素釋放激素   克隆   基因表達  

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